细胞生物学
酶免试剂盒
细胞因子（重组蛋白）
生化试剂
实验用抗体
分子生物学
蛋白研究
实验室仪器
实验室耗材
技术服务
上海研卉生物科技有限公司
地址：上海市嘉定区叶城路1288号
电话：021-69000211
联系人：李先生
手机：18702156455
传真：021-69000211
MSN：yanhuibio@hotmail.com
QQ：1320534253,245676794
邮箱：yanhuibio@163.com
CAR-T检测用Fluorokines，Fluorokines荧光标记CAR-T重组蛋白（如 CD19和BCMA）
发布日期：2022/4/13
CAR-T检测用Fluorokines，Fluorokines荧光标记CAR-T重组蛋白（如 CD19和BCMA）
对于 CAR-T 细胞疗法，发挥肿瘤杀伤作用的有效成分是 CAR 阳性的 T 细胞，因而 CAR 阳性表达率检测是 CAR-T 细胞产品质量控制的重要一环。流式细胞法是检测 CAR 阳性 T 细胞的常用手段。
R&D Systems® 全新推出 Fluorokines™ 荧光标记重组蛋白，将荧光基团与生物活性蛋白偶联，旨在通过流式细胞仪简化 CAR-T 细胞上特异性嵌合抗原受体（CAR）的检测。R&D Systems® 严格控制整个生产工艺，从而保证 Fluorokines™ 蛋白的批间一致性、F/P 比一致性，以及活性与未标记蛋白的一致性。
什么是 CAR-T 细胞疗法？
CAR-T 细胞疗法如日中天，并可用于治疗血液系统癌症，包括急性淋巴细胞白血病（ALL）、急性髓性白血病（AML）、淋巴瘤和多发性骨髓瘤（MM）[1]。该细胞疗法从患者体内取出 T 细胞，对细胞进行基因工程改造，使其表达嵌合抗原受体（CAR）。CAR 是一种合成的 T 细胞受体，胞外域由抗体衍生的抗原结合 scFv（单链可变片段）组成，可与特异性靶抗原结合；胞内包含一个或多个共刺激分子，以提高 T 细胞增殖活性、细胞毒性。CAR 修饰的 T 细胞在体外扩增后，再回输到患者体内，与患者肿瘤细胞表面的特异性抗原结合并被激活，进而攻击并破坏肿瘤细胞。
测 CAR 的表达是了解患者体内 CAR 阳性 T 细胞剂量的重要步骤。用荧光标记蛋白可直接染色表达相应 CAR 的靶细胞，便于通过流式细胞仪进行检测。
常用靶向抗原：CD19 和 BCMA
CAR-T 细胞表达针对不同肿瘤表面抗原（包括 CD19 和 BCMA）的 CAR。CD19 是一种抗原，广泛表达于 B 细胞来源的肿瘤上，是 CAR-T 细胞疗法最受欢迎的靶点之一 [1]。2021 年，两种抗 CD19-CAR-T 细胞疗法已获得中国国家药品监督管理局（NMPA）的批准：复星凯特的阿基仑赛注射液（奕凯达）以及药明巨诺的瑞基奥仑赛注射液（倍诺达）。
CAR-T 细胞治疗的第二大靶向肿瘤抗原是 B 细胞成熟抗原（BCMA）[1]。BCMA 参与调节 B 细胞成熟和分化成浆细胞，并且在恶性浆细胞上的表达水平通常高于正常浆细胞 [2,3]。目前多项研究聚焦抗 BCMA CAR-T 细胞疗法用于多发性骨髓瘤的治疗，并展示出可喜的结果[2,3]。CAR-T 细胞疗法临床试验中正在研究的其他优质靶标包括 GD2、EGF R、HER2、Mesothelin、CD20、CD22、CD30、CD33、CD123、Glypican-3 和 NKG2D[1]。
Fluorokines™：点亮 CAR 阳性 T 细胞
Fluorokines™ 的主要优点是可以通过流式细胞仪直接染色并检测表达相应 CAR 的靶细胞。该方法具有高度特异性，减少了检测时间，并避免了间接检测 CAR 可能发生的非特异背景染色，如使用表位标记靶抗原和荧光标记二抗。
Fluorokines™ 的生物活性和批间一致性检测：
• Fluorokines™ 可与相应单克隆抗体偶联的磁珠结合；
• 确保 Fluorokines™ 能通过流式细胞术对相应的 CAR-T 细胞进行染色；
• Fluorokines™ 表现出高度的批间一致性，与未经 Fc 标记的重组蛋白具有相同的高水平活性。
CAR 检测用 Fluorokines 一览表（略）
|
Protein |
Species |
Source |
Tag |
Fluorescent Label |
Catalog # |
Bioactivity |
|
BCMA |
Human |
NS0 |
Fc |
Alexa Fluor® 488 |
AFG193 |
Binds anti-BCMA monoclonal antibody conjugated beads |
|
Alexa Fluor® 647 |
AFR193 |
|||||
|
Atto 488 |
ATJ193 |
|||||
|
Atto 647N |
ATM193 |
|||||
|
CD19 |
Human |
CHO |
Fc |
Alexa Fluor® 488 |
AFG9269 |
Binds anti-CD19 monoclonal antibody conjugated beads |
|
Alexa Fluor® 647 |
AFR9269 |
|||||
|
Atto 488 |
ATJ9269 |
|||||
|
Atto 647N |
ATM9269 |
|||||
|
EMMPRIN/CD147 |
Human |
NS0 |
Fc |
Alexa Fluor® 488 |
AFG972 |
Binds anti-EMMPRIN/CD147 monoclonal antibody conjugated beads |
|
Alexa Fluor® 647 |
AFR972 |
|||||
|
CD300e |
Human |
HEK293 |
Fc |
Alexa Fluor® 488 |
AFG10479 |
Binds anti-CD300e monoclonal antibody conjugated beads |
|
Alexa Fluor® 647 |
AFR10479 |
|||||
|
ErbB2/Her2 |
Human |
NS0 |
Fc |
Alexa Fluor® 488 |
AFG1129 |
Binds anti-ErbB2/Her2 monoclonal antibody conjugated beads |
|
Alexa Fluor® 647 |
AFR1129 |
|||||
|
Mesothelin |
Human |
NS0 |
His |
Alexa Fluor® 488 |
AFG3265 |
Binds anti-Mesothelin monoclonal antibody conjugated beads |
|
Alexa Fluor® 647 |
AFR3265 |
|||||
|
MUC-1 |
Human |
HEK293 |
Fc |
Alexa Fluor® 488 |
AFG10332 |
Binds anti-MUC-1 monoclonal antibody conjugated beads |
|
Alexa Fluor® 647 |
AFR10332 |
|||||
|
OX40 |
Human |
NS0 |
Fc |
Alexa Fluor® 488 |
AFG3388 |
Binds anti-OX40 monoclonal antibody conjugated beads |
|
Alexa Fluor® 647 |
AFR3388 |
|||||
|
PD-1 |
Human |
NS0 |
Fc |
Alexa Fluor® 488 |
AFG1086 |
Binds anti-PD-1 monoclonal antibody conjugated beads |
|
Alexa Fluor® 647 |
AFR1086 |
|||||
|
Siglec-2 / CD22 |
Human |
NS0 |
Fc |
Atto 488 |
ATJ1968 |
Binds anti-Siglec-2 / CD22 monoclonal antibody conjugated beads |
|
Atto 647N |
ATM1968 |
|||||
|
Siglec-3 / CD33 |
Human |
NS0 |
Fc |
Alexa Fluor® 488 |
AFG1137 |
Binds anti-Siglec-3 / CD33 monoclonal antibody conjugated beads |
|
Alexa Fluor® 647 |
AFR1137 |
|||||
|
Atto 488 |
ATJ1137 |
|||||
|
Atto 647N |
ATM1137 |
|||||
|
TSLPR |
Human |
NS0 |
Fc |
Alexa Fluor® 488 |
AFG981 |
Binds anti-TSLPR monoclonal antibody conjugated beads |
|
Alexa Fluor® 647 |
AFR981 |
由于用标记的靶抗原直接检测 CAR 是目前评估 CAR 阳性 T 细胞的首选方法，R&D Systems® 正在努力研发更多的 Fluorokines™ 荧光标记蛋白。作为替代方法，我们还能提供了 Avi-Tag 生物素化蛋白，可用荧光标记的链霉亲和素进行检测。