细胞组织RNA纯化试剂盒

QIAGEN RNeasy Plus Mini Kit (50) 74134

从培养的细胞和组织样本中纯化至多100 µg总RNA，配有gDNA去除柱


独特的gDNA Eliminator柱，无需DNase处理
有效去除基因组DNA
数分钟内得到RNA，产量重复性好
RNA在敏感的下游应用中表现出色

RNeasy Plus Mini Kit将快速方便的RNA纯化与高效去除基因组DNA整合在一起，可纯化至多100 µg RNA。细胞或组织裂解液流过gDNA去除柱，去除基因组DNA。然后使用RNeasy Mini离心柱纯化总RNA。该试剂盒可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动化进行。可使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent方便的稳定组织样本，并使用TissueRuptor或TissueLyser体系高效破碎样本。处理较小样本，可使用RNeasy Plus Micro Kit（离心柱的结合能力为45 µg RNA）。
高效去除细胞的基因组DNA。
使用 [A] RNeasy Plus Mini Kit或者 [B] Supplier AV的整合基因组DNA去除步骤的RNA纯化试剂盒，从Jurkat细胞样本（每个样本1 x 106个细胞）中纯化总RNA。使用（+RT）或不使用（-RT）逆转录酶对β-actin进行两次重复的real-time RT-PCR分析。-RT曲线证明，使用RNeasy Plus Mini Kit纯化的RNA中几乎不含基因组DNA。

原理

细胞和易裂解组织首先在含有异硫氰酸胍的高变性Buffer RLT Plus中裂解和匀质化，该缓冲液能使RNases立即失活，以保证分离到完整的RNA。裂解液再流过gDNA Eliminator柱。该离心柱与高盐缓冲液共同作用，可选择性高效的去除基因组DNA。加入乙醇以提供RNA结合的合适条件，样本再加入到RNeasy Mini离心柱。含有硅胶膜的特制离心柱能特异性的结合裂解细胞中的RNA。

应用

RNeasy Plus Mini Kit纯化得到的RNA适合对少量DNA敏感的下游应用，如定量real-time RT-PCR。纯化得到的RNA还可以用于其他应用。