REPLI-g UltraFast Mini Kit (25)基因组扩增试剂盒

150033  25T

用于从珍贵或少量样本中超快速，高度均一地进行全基因组扩增
快速全基因组扩增，仅需1–1.5小时
获得无限量DNA适合多种下游应用
从各种起始样本中进行高重复性扩增
高度稳定的DNA适合长期储存

基因组DNA量不足以进行基因组分析，这一问题可通过样本内全基因组DNA扩增解决。REPLI-g UltraFast Kit包含REPLI-g UltraFast DNA Polymerase，该聚合酶可在60–90分钟内高度均一、正确的对少量样本进行全基因组扩增，通常20 μl反应体系产量可达7 μg。起始样本可以是基因组DNA、新鲜或干血、口腔拭子、新鲜或冷冻组织和培养细胞等。扩增得到的DNA可即用于多种基因分析。

DNA扩增产量高。
使用REPLI-g UltraFast Mini Kit对基因组DNA样本（每个10 ng）和无模板对照（NTC）样本（不含模板DNA）进行扩增，不同时间后测定DNA产量。扩增60分钟后的平均产量是7 µg，扩增90分钟后平均产量是10–13 µg。45分钟后即可获得多至5 µg DNA，可快速用于下游基因分析。在无模板对照反应中未检测到DNA。

原理

用于基因组分析的基因组DNA量通常十分有限。全基因组扩增技术通过对样本中的所有DNA进行全基因组扩增，为下游应用提供足量的DNA，克服这一问题。REPLI-g UltraFast技术可高度均一的进行全基因组扩增，序列偏差小。该方法基于MDA技术，采用独特的DNA聚合酶进行等温基因组扩增，可在较短时间内扩增得到长达100 kb的DNA产物，避免了基于PCR的扩增方法中常见的高序列偏差。此外，独特的碱性变性缓冲液确保了基因组DNA的温和变性，避免热变性导致的模板DNA片段化。因此可确保在下游应用中获得更加灵敏、更加可靠的结果。
操作流程
使用REPLI-g UltraFast Mini Kit进行全基因组扩增需要3个基本步骤。首先，对样本（10 ng纯化的基因组DNA、0.5 µl全血或300个组织培养细胞）进行温和的碱变性，避免模板DNA片段化。然后中和样本，加入REPLI-g UltraFast DNA Polymerase于30°C孵育。60分钟后可获得产物，扩增得到的DNA无需纯化，可即用于下游应用。

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